ELISA檢測(cè)試劑盒的操作訣竅！

ELISA檢測(cè)試劑盒操作秘訣賞析！
    有2種方法來檢驗(yàn)試驗(yàn)的度：通常用變異系數(shù)來表示，①幾個(gè)樣品用ELISA法同時(shí)進(jìn)行多次測(cè)定求出CV%；②不同時(shí)間對(duì)不同操作者對(duì)某幾個(gè)樣進(jìn)行多次測(cè)定求出變異系數(shù)。CV是個(gè)體參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差與平均數(shù)的比率。

     不論目測(cè)或分光光度計(jì)測(cè)定，均可作一個(gè)稀釋度或一系列稀釋度測(cè)定，一般常規(guī)診斷只用一個(gè)稀釋度判斷陽性或陰性就可以了，這樣比較方便，現(xiàn)在推薦傳染病的血清診斷用1：200一個(gè)稀釋度。有些需要定量的，可作一系列稀釋度測(cè)定。記錄結(jié)果有下列幾種方法：
    1.“+"或“-"：所有超過規(guī)定的OD值(如OD，0.4)的標(biāo)本均屬陽性，此規(guī)定OD值是根據(jù)事先測(cè)定大量陰性標(biāo)本所取得的，此規(guī)定值是陰性標(biāo)本的上限。ELISA檢測(cè)試劑盒或者以一組陰性標(biāo)本OD平均值加2～3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差作為陽性閾值。
   2.直接以O(shè)D值來表示，如0.4、0.7、1.2，OD值越大，陽性反應(yīng)越強(qiáng)，但此數(shù)值是在固定實(shí)驗(yàn)條件下得到的結(jié)果，而且每次實(shí)驗(yàn)都要有參考標(biāo)本作對(duì)照。
   3.以終點(diǎn)滴度表示：將標(biāo)本作連續(xù)稀釋，zui高稀釋度能出現(xiàn)陽性反應(yīng)者(即OD值仍大于陽性閾值)，即為該標(biāo)本的滴度。
   4.以“比值"表示：求出被檢標(biāo)本的OD值與一組陰性標(biāo)本OD值的比值，例如為陰性標(biāo)本的2倍或3倍，即為陽性，比值小于2.1而大于1.5為可疑，<1.5為陰性。
    5.以“單位"來表示：在測(cè)定被檢標(biāo)本的同時(shí)，再測(cè)定一個(gè)含已知單位數(shù)的陽性參考血清，用不同稀釋度作ELISA檢測(cè)試劑盒后，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，單位數(shù)為橫坐標(biāo)，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。以后可根據(jù)被檢標(biāo)本的OD值，從曲線上找出相應(yīng)的單位數(shù)，再乘于血清的稀釋倍數(shù)，即可得出被檢標(biāo)本的單位數(shù)。