關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清的五大問題
點(diǎn)擊次數(shù)：1718 更新時(shí)間：2015-10-09
問題一：如何保管標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清
對于準(zhǔn)綿羊血清的保存，小編建議長期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月，由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
問題二：如何解凍標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清
標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清需采用逐步解凍法：-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
問題三：如何處置血清凍結(jié)后的絮狀沉積物
當(dāng)血清凍結(jié)后出現(xiàn)了絮狀沉積物，我們應(yīng)該仔細(xì)分析出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因，一般來說，zui通常的原因就是血清中脂蛋白的變性構(gòu)成的，而血纖維蛋白(構(gòu)成凝血的蛋白之一)在血清凍結(jié)后，也會(huì)存在于血清中，亦是構(gòu)成血清沉積物的主要緣由之一。想要去除血清凍結(jié)后的絮狀沉積物，我們可以將血清分裝至無菌離心管中，以400g略微離心，上清液即可接著參加培育基內(nèi)一同過濾。
問題四：如何防止絮狀沉積物出現(xiàn)
防止絮狀沉積物出現(xiàn)的方法就是注重正確的血清凍結(jié)進(jìn)程，并盡量防止滅活血清及長時(shí)刻的將血清置于高溫環(huán)境中。
問題五：為什么要做熱滅活
熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清，加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻，此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活，除非必須，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多。
試驗(yàn)顯現(xiàn)，通過正確處置的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需求的。通過處置的血清對細(xì)胞成長只要細(xì)小的推進(jìn)，或*沒有任何效果，乃至一般由于高溫處置影響了血清的質(zhì)量，而構(gòu)成細(xì)胞成長速率的下降。而通過熱處置的血清，沉積物的構(gòu)成會(huì)明顯的增多，這些沉積物在倒置顯微鏡下調(diào)查，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研討者誤以為是血清遭受污染，而把標(biāo)準(zhǔn)綿羊血清放在3 7℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉積物更增多，使研討者認(rèn)為是微生物的割裂擴(kuò)增。
